体外实验系统来源广泛，具有潜在的生物安全风险。实验室应对生物材料建立验收制度。来源于实验动物的组织或器官最好附有来源实验动物的质量合格证明，生产商还应提供当地科技主管部分颁发的生产许可证。进口生物材料应是合法渠道，附有海关许可文件、采购合同，以及完整保留与商品相关的卫生和生物安全风险资料。图4是广州某公司某次从MatTek公司位于斯洛伐克的工厂进口皮肤模型的海关文件、模型质保负责人员签名和产品MSDS清单等文件。

图4 海关进口皮肤模型的证明

化妆品体外检测通常会用到生物材料，如现在比较普及的鸡胚、牛眼、细胞和人工皮肤等。对于细胞系或组织工程皮肤，应确保其来源清楚，确保没有微生物污染。需要长期保存的细胞株，应先进行支原体鉴定，再进行传代保存。对一次性使用的组织工程材料，如人工皮肤产品应做好批次检查并存档产品生物安全单。体外实验室还会接收或分离来自人或动物的细胞，如人的皮肤组织、动物的毛发、离体的牛眼或兔子的眼球或皮肤。应登记供体信息来源，并确保真实。对关键生物材料，如来自实验动物的材料，如鸡胚、兔皮肤或眼球、猪皮肤或眼球、小鼠毛囊，应注意这些动物可能携带的微生物干扰实验结果，甚至可能具有人畜共患病的生物安全风险，如禽流感和大鼠出血热都是严重可能致死的传染病。应向供应商索取实验动物生产许可证，对鸡胚应附有检疫证明，符合有关标准，表1列出了国家标准（GB/T17999.1）要求的鸡胚微生物监测要求。实验室切记不可贪图便宜，从农户购买实验用材料，不仅实验结果没有保障，还有可能带来生物安全风险。对于畜牧业的废弃材料，如离体牛眼，应是合法和固定来源的，禁止向个人购买实验用生物材料。实验结束后生物材料应冷冻暂存，集中移交由合法的卫生处理场统一处理。

备注：AGP-琼脂扩散试验；HI-血凝抑制试验；SPA-血清平板凝集试验；ELISA-酶联免疫吸附试验；CO-临床观察

以皮肤模型的质控要求为例。皮肤模型的验收包括一般验收和技术验收。实验室在收到材料后立即验收皮肤模型的外包装、内包装、数量、状态（颜色、温度等）、所附材料（MSDS，生物安全证明）等。技术验收包括观察模型正反面是否出现破损和空泡等异常情况，并观察模型表面有无异常颜色或其他物质。模型孵育于培养液后，观察培养液是否渗漏至上层，合格的模型培养液不会漏至模型表面。皮肤模型应达到其声称的质量要求，不同商品化的模型特点不尽相同[2]，如表3所示。质控要求也有差异，如同样是列入OECD指南492认可的角膜模型，采用了不同的质控方法[11]。表4所示，EpiOcular™和MCTT HCE™模型采用了ET50的质控方法，而SkinEthic™模型（中国有产生）和LabCyte CORNEA-MODEL24模型采用了IC50的质控方法。图5为国产EPISKIN模型随商品的批次质控表。皮肤模型应满足多层角质结构，活性保持在>60%，对刺激剂反应一致。应向供应商索要上述证明。出于公正和受监督的原则，皮肤模型生产者不应从事使用该模型的外部检测工作。

图5 皮肤模型质控要求是验收的重要依据

实验室应建立维护试验系统稳定性的质量文件，最好有相对独立的良好细胞培养规范[10]，并强制执行，列入规范的内容如培养基测试、血清的质控；新引入细胞或组织的接收、测试和接收标准；试验系统污染的处置；试验系统的变动记录；收藏、存贮和处置研究废弃物的设施和设备；培养用具清洁去污和处置规程等。

在常规处理和维护过程中，应记录细胞系统的生长和生存特征（如细胞活力，倍增时间等）和传代培养细节（例如传代日期，传代时间间隔，播种密度，传代次数等）并在研究报告中记录，因为它们是结果完整可追溯性所必需的。测试系统供应商提供的文件应与历史数据一并提供，并用于确定验收标准。

每个实验设备应制定SOP，包括如何解冻，处理，计数，维护和保存细胞系的细节。例如，应建立程序明确地传代次数以及用来确定细胞储存活力所选择的测试。

原代细胞和组织材料的获取必须合法并符合伦理要求，包括人的和动物的伦理要求。对于具体实验还应考虑供体的差异，并且每批次都应确认质量或控制关键功能。应特别注意是否有微生物污染，如实做好记录。作为生物组织质量控制的重要部分，它们的分化状态也应记录，包括采用的测定方法，及培养过程中观察到的详细信息，如形态学，组织化学，细胞标志物，特异性组织功能和细胞-细胞基质相互作用等。体外实验系统的规范性管理是体外实验室可以持续稳定运行的前提。

注：经上海市毒理学会授权修改

致谢：感谢国家认监委科技支撑项目《体外方法实验室认可评价关键技术的研究》（2017RJWKJ10）和广州市经济技术开发区国际合作项目（2017GH11）的支持。

参考文献：

[10]Pamies D, Bal-Price A, Chesné C, et al. Advanced good cell culture practice for human primary, stem cell-derived and organoid models as well as microphysiological systems. ALTEX,2018, 35 (3), 353–378.

[11]OECD. 2019. Test Guideline No. 492:Reconstructed human cornea-like epithelium (RhCE) test method for identifying chemicals not requiring classification and labelling for eye irritation or serious eye damage. OECD Publishing.